X-GAL CAS: 7240-90-6 98٪ اڇو کان آف اڇو ڪرسٽل پائوڊر
| فهرست نمبر | XD90008 |
| شئ جو نالو | X-Gal (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside) |
| CAS | 7240-90-6 |
| ماليڪيولر فارمولا | C14H15BrClNO6 |
| ماليڪيولر وزن | 408.63 |
| اسٽوريج جا تفصيل | -2 کان -6 ° سي |
| هم آهنگ ٽيرف ڪوڊ | 29400000 |
پيداوار جي وضاحت
| حل جي ظاهر | صاف، بي رنگ کان هلڪو پيلو حل (DMF ۾ 50mg/ml:MeOH، 1:1) |
| مخصوص بصري گردش | -61.5 +/- 1 |
| ظاهر | اڇو کان آف-اڇو ڪرسٽل پائوڊر |
| پاڪائي HPLC | منٽ 99% |
| حل ڪرڻ (5٪ DMF ۾) | حليل (5٪ w/v، DMF) |
| پاڻي KF | وڌ ۾ وڌ 1٪ |
| Assay (HPLC Anhydrous بنيادن تي) | گھٽ ۾ گھٽ 98٪ w/w |
X-gal جو استعمال
X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside لاءِ BCIG پڻ مخفف آهي) هڪ نامياتي مرڪب آهي جيڪو گليڪٽوز تي مشتمل هوندو آهي متبادل انڊول سان ڳنڍيل آهي.هي مرڪب 1964ع ۾ جيروم هاروٽز ۽ ساٿين پاران ٺهرايو ويو هو. رسمي ڪيميائي نالو اڪثر ڪري مختصر ڪيو ويندو آهي گهٽ صحيح پر ان کان علاوه گهٽ پيچيده جملا جيئن ته بروموڪلوروئنڊوڪسيل گليڪٽوسائيڊ.انڊوڪسيل مان X شايد X-gal جي ڀڃڪڙي ۾ X جو ذريعو ٿي سگھي ٿو.ايڪس-گل اڪثر ڪري سالماتي حياتيات ۾ استعمال ڪيو ويندو آهي هڪ اينزيم، β-galactosidase جي موجودگي جي جانچ ڪرڻ لاء، ان جي معمولي ٽارگيٽ جي جاء تي، هڪ β-galactoside.اهو پڻ هسٽو ڪيمسٽري ۽ بيڪٽيرياولوجي ۾ هن اينزيم جي سرگرمي کي ڳولڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي.X-gal ڪيترن ئي انڊوڪسيل گلائڪوسائيڊس ۽ ايسٽرز مان هڪ آهي، جيڪي انزائيم-ڪيٽيلائيزڊ هائيڊولائسز جي نتيجي ۾ انڊگو ڊائي سان ملندڙ ناقابل حل نيري مرکبات پيدا ڪن ٿا.
X-gal lactose جو ھڪڙو اينالاگ آھي، ۽ تنھنڪري β-galactosidase enzyme ذريعي ھائيڊولائيز ٿي سگھي ٿو جيڪو ڊي-ليڪٽوز ۾ β-گلائڪوسيڊڪ بانڊ کي صاف ڪري ٿو.X-gal، جڏهن β-galactosidase سان ٺهڪي اچي ٿي، تڏهن galactose ۽ 5-bromo- 4-chloro-3-hydroxyindole- 1 پيدا ٿئي ٿو. بعد ۾ پوءِ خودبخود ڊمرائيز ٿي وڃي ٿو ۽ 5,5'-dibromo-4,4'-dihloro ۾ آڪسائيڊ ٿي وڃي ٿو. -انڊيگو - 2، هڪ انتهائي نيري پيداوار جيڪا ناقابل حل آهي.X-gal خود بي رنگ آهي، تنهنڪري نيري رنگ جي پيداوار جي موجودگي کي فعال β-galactosidase جي موجودگي لاء ٽيسٽ طور استعمال ڪري سگهجي ٿو.اهو پڻ اجازت ڏئي ٿو بيڪٽيريا β-galactosidase (جيڪو lacZ سڏيو وڃي ٿو) مختلف ايپليڪيشنن ۾ رپورٽر طور استعمال ڪيو وڃي.
ٻن-هائبرڊ تجزيي ۾، β-galactosidase شايد هڪ رپورٽر طور استعمال ڪري سگهجي ٿي پروٽينن جي سڃاڻپ ڪرڻ لاء جيڪي هڪ ٻئي سان لهه وچڙ ڪن ٿا.هن طريقي ۾، جينوم لائبريري کي خمير يا بيڪٽيريا سسٽم استعمال ڪندي پروٽين جي رابطي لاء اسڪريننگ ٿي سگهي ٿي.جتي پروٽينن جي وچ ۾ هڪ ڪامياب رابطي جي اسڪريننگ ڪئي پئي وڃي، ان جي نتيجي ۾ هڪ ايڪٽيوشن ڊومين کي پروموٽر کي پابند ڪرڻ جو نتيجو ٿيندو.جيڪڏهن پروموٽر هڪ lacZ جين سان ڳنڍيل آهي، β-galactosidase جي پيداوار، جنهن جي نتيجي ۾ X-gal جي موجودگي ۾ نيري رنگن واري ڪالونيون ٺاهي ٿي، تنهن ڪري پروٽين جي وچ ۾ ڪامياب رابطي جي نشاندهي ڪندو.هي ٽيڪنڪ شايد 106 کان گهٽ سائيز جي اسڪريننگ لائبريرين تائين محدود ٿي سگهي ٿي. X-gal جي ڪامياب صفائي پڻ انڊول جي ويڪرائيزيشن جي ڪري هڪ خاص طور تي خراب گند پيدا ڪري ٿي.
جيئن ته X-gal بذات خود بي رنگ آهي، نيري رنگ جي پيداوار جي موجودگي کي استعمال ڪري سگهجي ٿو ٽيسٽ جي طور تي هڪ فعال β-galactosidase جي موجودگي لاء.
هڪ فعال اينزائم جي اها آسان سڃاڻپ βgalactosidase (lacZ جين) جي جين کي مختلف ايپليڪيشنن ۾ رپورٽر جين طور استعمال ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿي.
