مصنوعات

Tris acetate لوڻ اڪثر TAE (Tris-acetate-EDTA) بفر جي تياري ۾ استعمال ڪيو ويندو آهي، جيڪو هلندڙ بفر طور استعمال ڪيو ويندو آهي ۽ ايگرز جيل ۾.Tris Acetate-EDTA بفر DNA agarose gel electrophoresis لاءِ استعمال ٿيندو آهي پر RNA agarose gel electrophoresis لاءِ به استعمال ٿيندو آهي.ڊبل اسٽرينڊ ڊي اين اي ٻين بفرن جي ڀيٽ ۾ TAE ۾ تيزيءَ سان هلڻ جي ڪوشش ڪندو آهي ۽ وڌايل اليڪٽرروفورسس دوران ختم ٿي سگهي ٿو.وڌايل اليڪٽرروفورسس جي دوران بفر جي گردش يا بفر جي متبادل هيٺين بفرنگ جي گنجائش کي ختم ڪري سگھي ٿي.حل ۾ ڊي اين اي جي متحرڪ مطالعي لاءِ مختلف ڪنسنٽريشن تي استعمال ٿي سگھي ٿو.TBE بفر ۾ بورٽ (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X پائوڊر پيڪ، sc-296651) ڪيترن ئي اينزيما لاء هڪ مضبوط رڪاوٽ آهي، TAE بفر جي سفارش ڪئي وئي آهي جڏهن ڊي اين اي نموني لاء اينزيميٽڪ ايپليڪيشنن کي ڏسي.Tris acetate لوڻ پڻ ATP assays ۾ فائر فلائي لوسيفرس سان گڏ اعلي حساسيت سان گڏ هڪ بفر آهي.

استعمال: TAE رننگ بفر سڀ کان عام طور تي استعمال ٿيل بفر آھي ڊي اين اي ايگرز جيل اليڪٽرروفورسس لاءِ، ۽ پڻ استعمال ڪيو ويندو آھي مقامي آر اين اي اگروز جيل اليڪٽرروفورسس لاءِ.ڊبل اسٽرينڊ ڊي اين اي TAE ۾ ٻين بفرن جي ڀيٽ ۾ تيزيءَ سان هلڻ جو رجحان رکي ٿو، پر ڊگھي اليڪٽرروفورسس دوران بفر آئنز جي گھٽتائي سبب ترڻ ۾ به ناڪام ٿئي ٿو.ڊگھي اليڪٽرروفورسس دوران بفر سائيڪلنگ يا بفر ايڪسچينج هيٺين بفر جي گنجائش لاءِ معاوضو ڏئي سگھي ٿو.2 1 mMTAE بفر حاصل ڪرڻ لاءِ مرڪوز TAE بفر کي گھٽايو جنهن ۾ 40 ايم ايم ٽريس ايسٽيٽ ۽ 1 ايم ايم EDTA، pH 8.3 شامل آهن.1 mMTAE بفر ٻنهي کي استعمال ڪري سگهجي ٿو agarose gels ۽ هڪ هلندڙ بفر طور.وڌ ۾ وڌ ريزوليوشن لاءِ، اها سفارش ڪئي وئي آهي ته لاڳو ٿيل وولٽيج 5V/cm کان گهٽ هجي (يونٽ اليڪٽروڊس جي وچ ۾ فاصلو).

ائپليڪيشن: TAE هلندڙ بفر ڪيميائي بڪ جيل ۾ ڊي اين اي ايگرز جيل اليڪٽرروفورسس لاءِ سڀ کان عام استعمال ٿيل بفر آهي، ۽ اهو پڻ غير رد ڪرڻ واري آر اين اي ايگرز جيل الیکٹروفورسس لاءِ استعمال ٿيندو آهي.ڊبل اسٽرينڊ ڊي اين اي TAE ۾ ٻين بفرن جي ڀيٽ ۾ تيزيءَ سان هلڻ جو رجحان رکي ٿو، پر ڊگھي اليڪٽرروفورسس دوران بفر آئنز جي گھٽتائي سبب ترڻ ۾ به ناڪام ٿئي ٿو.ڊگھي اليڪٽرروفورسس دوران بفر سائيڪلنگ يا بفر ايڪسچينج هيٺين بفر جي گنجائش لاءِ معاوضو ڏئي سگھي ٿو.مرڪوز TAE بفر کي 1 mMTAE بفر حاصل ڪرڻ لاءِ ملائي ڇڏيو ويو جنهن ۾ 40 ايم ايم ٽريس ايڪٽيٽ ۽ 1 ايم ايم EDTA، pH 8.3 شامل آهن.1 mMTAE بفر ٻنهي کي استعمال ڪري سگهجي ٿو agarose gels ۽ هڪ هلندڙ بفر طور.وڌ ۾ وڌ ريزوليوشن لاءِ، اها سفارش ڪئي وئي آهي ته لاڳو ٿيل وولٽيج 5V/cm کان گهٽ هجي (يونٽ اليڪٽروڊس جي وچ ۾ فاصلو).

استعمال: فائر فلائي لوسيفرس سان اي ٽي پي جي ڳولا ۾، هي پيداوار سڀ کان وڌيڪ حساس بفر آهي؛گلوٽاميٽ بائنڊنگ جو پتو لڳائڻ.

غير رسيپٽر مواد کي [3H]l-glutamic اسيد جي بي ترتيبي پابند.

[3H] L-glutamic acid جو پابند مائڪروفيوج ٽيوب ۽ گلاس کي چار بفرن ۾ تحقيق ڪئي وئي.انهن مواد جي پس منظر جي پابند نه هئي، پر ٽريس-ايڇ سي ايل ۽ ٽريس-سيٽريٽ بفر ۾ سينٽرفيوگريشن يا سکشن ذريعي وڌايو ويو.هي پابند گهڻو گهٽ هو يا جڏهن HEPES-KOH، يا Tris-acetate بفر بدران استعمال ڪيو ويو.[3H]L-glutamate مائيڪروفيوج ٽيوب کي پابند ڪيو ويو L- پر گلوٽاميٽ ۽ اسپارٽٽ جي ڊي-آئسومر نه.DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic acid پڻ پابند نه ڪيو.ٻيا مرڪب جيڪي گهٽ ۾ گهٽ اعتدال پسند منع ڏيکاريا ويا هئا: N-methyl-D-aspartate، quisqualate، L-glutamic acid diethyl ester، N-methyl-L-aspartate، kainate، ۽ 2-amino-4-phosphonobutyrate.بائنڊنگ کي رد ٿيل چوٿون دماغي جھلي طرفان روڪيو ويو.هڪ پروٽين-انحصار [3H] گلوٽاميٽ بائنڊنگ حاصل ڪئي وئي بار بار منجمد ٿيل جھلي جي تياري سان جڏهن بائنڊنگ ٽريس-ايڪٽيٽ بفر ۾ ڪيو ويو.اهو سفارش آهي ته Tris-acetate يا HEPES-KOH بفر استعمال ڪيو وڃي گلوٽاميٽ بن ڊنگ assay ۾.جيڪڏهن Tris-HCl يا Tris-citrate بفر استعمال ڪيو وڃي ته، مائڪروفيوج ٽيوب يا گلاس فائبر فلٽرن کي پابند ڪرڻ لاءِ درست ڪرڻ لاءِ مناسب ڪنٽرول تجربو ڪيو وڃي.