مصنوعات

نئون اعلي ڪارڪردگي مائع ڪروميٽوگرافي جو امتحان گلائڪوسائل ٽرانسفراسس لاءِ ڊيريوٽائيزيشن جي بنياد تي اينٿرنيلڪ ايسڊ ۽ فلورسنس جي چڪاس سان.

Assays 2-aminobenzoic acid (2AA; anthranilic acid, AA) جي منفرد ليبلنگ ڪيمسٽري استعمال ڪندي ترقي ڪئي وئي ٻنهي β1-4 galactosyltransferase (GalT-1) ۽ α2-6 sialyltransferase (ST-6) جي سرگرمين کي ماپڻ لاءِ اعليٰ ڪارڪردگي مائع ذريعي. ڪروميٽوگرافي (HPLC) فلورسنس جي سڃاڻپ سان (Anumula KR. 2006. گلائڪوپروٽين ڪاربوهائيڊريٽ جي اعلي ڪارڪردگي مائع ڪروميٽوگرافڪ تجزيي لاءِ فلوروسينس ڊيريوٽائيزيشن طريقن ۾ واڌارو. مقعد بايو ڪيم. 350: 1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) ۽ N-acetyllactosamine استعمال ڪيا ويا قبول ڪندڙ ۽ uridine diphosphate (UDP)-galactose ۽ cytidine monophosphate (CMP)-N-acetylneuraminic acid (NANA) بالترتيب GalT-1 ۽ ST-6 لاءِ ڊونرز جي طور تي.اينزيميٽڪ پراڊڪٽس AA سان سيٽو ۾ ليبل ڪيا ويا ۽ عام مرحلن جي حالتن کي استعمال ڪندي TSKgel Amide 80 ڪالمن تي ذيلي ذخيري کان جدا ڪيا ويا.Enzyme يونٽن جي چوٽي وارن علائقن مان مقرر ڪيا ويا آھن جي مقابلي ۾ ھڪٻئي سان نڪتل معيار جي Gal-β1-4GlcNAc ۽ NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc.لڪيريت (وقت ۽ اينزيم ڪنسنٽريشن)، سڌائي (انٽرا- ۽ انٽراسسي) ۽ انسائيڪلوپيڊيا لاءِ ٻيهر پيداوار قائم ڪئي وئي.اڪيلائي ۽ صاف ڪرڻ دوران اينزيم جي سرگرمين جي نگراني ڪرڻ ۾ مددگار ثابت ٿي ويا.Assays انتهائي حساس هئا ۽ روايتي ريڊيو ايڪٽيو شگر جي بنياد تي ماپ جي برابر يا بهتر ڪارڪردگي هئي.Asay فارميٽ پڻ استعمال ڪري سگھجي ٿو ٻين منتقلي جي سرگرمي کي ماپڻ لاءِ، بشرطيڪ ڪاربوهائيڊريٽ قبول ڪندڙ ليبلنگ لاءِ گھٽتائي واري آخر تي مشتمل ھجن.Glycoprotein قبول ڪرڻ وارن لاءِ هڪ اڀياس IgG استعمال ڪندي ترقي ڪئي وئي.هڪ مختصر HPLC پروفائلنگ جو طريقو IgG glycans (bitennary G0, G1, G2, mono- and disialylated) جي علحدگيءَ لاءِ تيار ڪيو ويو، جنھن تيزيءَ سان GalT-1 ۽ ST-6 سرگرمين جي تعين کي آسان ڪيو.ان کان علاوه، هي پروفائلنگ جو طريقو ڪلينڪل سيٽنگن ۾ IgG گليڪنس ۾ تبديلين جي نگراني لاء مفيد ثابت ٿيڻ گهرجي.